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Estudiode Enfermedad Residual Mínima en niñoscon Leucemia ...

Microsoft PowerPoint - 1645(1) Dra. Cabrera.ppt

Enviado* el 31/12/2010 19:36
Estudiode Enfermedad Residual Mínima en niñoscon Leucemia Linfoblástica Aguda (LLA) porcitometríade flujo MarinovN 1, Cabrera ME 1, Campbell M.2 1 Laboratoriode Hematología Hospital del Salvador 2 Coordinadora PINDA
INTRODUCCION •La velocidadde reducciónde la masa leucémicadurantelosprimerosmeses de tratamiento, esun factor pronóstico en LLA. •EstudioERM permiteidentificar precozmenteel riesgode recaíday adecuarlasestrategiasterapeuticas.
OBJETIVO Determinarel nivelde ERM  por citometríade flujo, en niñoscon leucemialinfoblásticaaguda ( LLA) quefuerontratadoscon el protocoloPINDA.
MATERIAL •Médulaóseade niñosLLA, 2003-2005. •Citómetrode flujoFACSCalibur Becton & Dickinson. •Panel anticuerposmonoclonales conjugados con 4 fluorocromos: FITC( Isotiocianatede fluoresceína) , PE( phycoerithrin), PerCP (peridininchlorophyll-A protein), APC ( allophycocyanin).
METODO •Basadoen la identificaciónde combinacionesfenotípicasaberrantes en célulasleucémicas, queno están presentesen las célulasnormales. •Aplicablea másdel 90% de los pacientes. •Sensibilidad: 1x10-5. •ERM positiva: > 0.01% ó 1x10-4. •Puntosde estudio: semana5 y 12.
•Clasificaciónde riesgo, segúnERM: semana5 y 12, del iniciode la quimioterapia BAJO             INTERMEDIO              ALTO Semana5   ( + ) "       12 ( + ) Semana5   ( + ) "      12  (-) Semana5   (-) "      12  (-) Van DongenJJM, Lancet1998;352:1731-38.
TECNICA Primera incubación •FITC/ PE/ PerCP/APC I gG 1 / IgG 1 / IgG 1 / IgG 1 38 / 10  / 34  / 19 13 / 56 33 45 58 66c 15 TdT/ 10 /34 /19 22 Segunda incubación •Marcadores seleccionadossegún antígenos (+) Ej: 38 / 10 / 34 / 19 45 / 10 / 34 / 19 TdT/ 10 / 34 / 19 Coustain-SmithE, Blood2000;98:2691-96.
CD45(-), CD58 (+++), CD66c(++), CD15(+)
Segunda incubación al diagnóstico (solo ag aberrantes). S e repite semana5 y 12
RESULTADOS % 12 10 Sin Ag asociados leucemia 4 3 Problemastécnicos 79 64 Con seguimiento 5 4 Sin muestra 100 81 Niñosestudiados
RESULTADOS 14-16% 30-55 % Literatura 6  (35%) 7  (41%) 2005 11 (32%) 10 (29%) 2004 0 2 (14%) 2003 ERM(+) semana 12 ERM (+) semana5 Año
Distribuciónsegúngruposde riesgo 15 43 43 Literatura 35 12 53 2005 33 15 51 2004 7 14 78 2003 Alto (%) Intermedio (%) Bajo (%) Año (n)
CONCLUSIÓN •Factiblede realizarestudioERM en Chile y en el sistemapúblico. •Mejoríaprogresivade resultadosen semana5. •Excesofalsospositivossemana12, por aumentode progenitoresnormales. •Estatécnicarequierede experiencia para quesea reproducible y confiable.

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